【題目】如圖表示科學(xué)家培養(yǎng)轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白基因植物的過(guò)程,請(qǐng)回答:

(1)利用打孔器從煙草葉片上取多個(gè)大小相等的小圓片與重組農(nóng)桿菌共培養(yǎng)一晝夜后,接種在含卡那霉素的培養(yǎng)基上,為篩選出被農(nóng)桿菌感染的小圓片,作為運(yùn)載體的Ti質(zhì)粒應(yīng)含有________基因,運(yùn)載體上的_______________是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn).為了將目的基因整合到煙草細(xì)胞的_________________上,目的基因應(yīng)插入Ti質(zhì)粒的____________________片段上.

(2)圖中小圓片周圍長(zhǎng)出的結(jié)構(gòu)A稱為_______________,此后需要將生長(zhǎng)良好的結(jié)構(gòu)A轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上.圖中④過(guò)程為______________________.本實(shí)驗(yàn)可使用特殊的儀器在A中檢測(cè)目的基因的表達(dá)情況,請(qǐng)預(yù)測(cè)觀察到的現(xiàn)象是____________________________________________.

【答案】 卡那霉素抗性基因 啟動(dòng)子 染色體(核DNA) T-DNA 愈傷組織 再分化 (愈傷組織邊緣或局部細(xì)胞)發(fā)出綠色熒光

【解析】分析題圖圖示表示科學(xué)家培養(yǎng)轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白基因植物的過(guò)程,①是利用打孔器從植物葉片上取多個(gè)大小相等的小圓片;②是將植物小圓片與重組農(nóng)桿菌共同培養(yǎng);③表示脫分化過(guò)程,其中A為愈傷組織;④表示再分化過(guò)程,B為胚狀體

(1)作為運(yùn)載體的Ti質(zhì)粒應(yīng)含有標(biāo)記基因,即卡那霉素抗性基因,以便于篩選出被農(nóng)桿菌感染的小圓片;運(yùn)載體上的啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA 可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。為了將目的基因整合到煙草細(xì)胞的染色體(核DNA),以上DNA片段都必須在Ti質(zhì)粒的T-DNA片段上。

(2)由以上分析可知圖中小圓片周圍長(zhǎng)出的結(jié)構(gòu)A為愈傷組織;結(jié)構(gòu)B為胚狀體圖中A→B的④過(guò)程中需要加入生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,稱為再分化再經(jīng)形成植株。用特殊的儀器在A中檢測(cè)目的基因的表達(dá)情況,若目的基因(綠色熒光蛋白基因)已經(jīng)成功導(dǎo)入受體細(xì)胞并表達(dá),應(yīng)該會(huì)觀察到綠色熒光。

練習(xí)冊(cè)系列答案
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A. 構(gòu)建重組DNA時(shí),可用BglⅡSau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體

B. 構(gòu)建重組DNA時(shí),可用EcoRⅠSau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體

C. 圖乙中的Pl噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后,含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)

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