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小鼠基因敲除技術2007年獲諾貝爾獎。80年代初胚胎干細胞的分離和體外培養(yǎng)的成功奠定了基因敲除的技術基礎，87年Thompsson首次建立了完整的ESC基因敲除技術的模型，此后幾年中基因敲除技術得到了進一步的發(fā)展和完善，其技術路線如下。
①胚胎干細胞的獲得；
②構建重組基因表達載體；
③用一定方法把重組DNA轉入受體細胞內；
④用一定培養(yǎng)基篩選已擊中的細胞；
⑤將擊中的細胞轉入胚胎，通過胚胎移植使其生長為轉基因動物，然后對該動物進行形態(tài)觀察和分子生物學檢測。
異源抗體用于人體容易發(fā)生排異反應，若將動物抗體分子基因敲除，代之以人的抗體分子基因，那么人源抗體的產生將迎刃而解。根據上述材料回答下列問題：
（1）構建重組載體過程中，為使導人的目的基因能完成表達，需要在目的基因的首端和尾端各插入              ；
（2）上述過程中所需的胚胎通常通過供體獲得，再將處理過的胚胎移植到受體內培養(yǎng)，則胚胎移植前要對供體和受體進行              處理，若想培養(yǎng)出多個性狀表現(xiàn)一致的個體，可通過              技術；
（3）應用基因敲除技術可讓動物生產人源抗體，通�？蓪膭游矬w內提取的細胞的抗體分子基因敲除，代之以人的抗體分子基因，然后將該細胞通過細胞融合技術與骨髓瘤細胞融合，再通過              、              等過程篩選出能產生人源抗體的細胞群，再在培養(yǎng)液或小鼠腹腔進行培養(yǎng)，從而獲得所需抗體；
（4）用培養(yǎng)基篩選重組載體是否已擊中細胞，方法之一是啟動子缺失篩選法：原理是在重組載體的目的片段中插入一個啟動子缺失的正向選擇基因，同時目的基因片段也不包含該基因的啟動子序列。若基因載體和細胞基因組發(fā)生同源重組，則正向選擇基因可以在靶位點基因啟動子的作用下得以表達，使陽性細胞具有G418抗性（G418是一種細胞毒性藥物，對細胞有抑制或殺傷作用），從而從培養(yǎng)基中得到所需要的陽性克隆細胞，根據上述原理篩選導入成功的細胞的基本方法或過程是              。

（1）啟動子和終止子（兩者都填才給分）
（2）同期發(fā)情處理  胚胎分割移植  
（3）特定的選擇培養(yǎng)基、（動物細胞培養(yǎng)） 抗體陽性檢測  
（4）在培養(yǎng)基中加入G418（1分），然后培養(yǎng)處理過的細胞，能正常生長并增殖的細胞（1分）便是擊中的細胞

解析

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源： 題型：

（16分）小鼠基因敲除技術獲得2007年諾貝爾獎，該技術采用基因工程、細胞工程、雜交等手段使小鼠體內的某一基因失去功能，以研究基因在生物個體發(fā)育和病理過程中的作用。例如現(xiàn)有基因型為BB的小鼠，要敲除基因B，可先用體外合成的突變基因b取代正�；駼，使BB細胞改變?yōu)锽b細胞，最終培育成為基因敲除小鼠。

（1）基因敲除過程中外源基因是否導入受體細胞，可利用重組質粒上的            檢測。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，則可能導致細胞內的                 被激活，使小鼠細胞發(fā)生癌變。

（2）通過基因敲除，得到一只AABb小鼠。假設棕毛基因A、白毛基因a、褐齒基因B和黃齒基因b均位于常染色體上，現(xiàn)要得到白毛黃齒新類型小鼠，用來與AABb小鼠雜交的純合親本的基因型是             ，雜交子代的基因型是             。讓F1代中雙雜合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中帶有b基因個體的概率是                      。不帶B基因個體的概率是                   。

（3）在上述F1代中只考慮齒色這對性狀，假設這對性狀的遺傳屬X染色體伴性遺傳，則表現(xiàn)黃齒個體的性別是           ，這一代中具有這種性別的個體基因是           。

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科目：高中生物 來源： 題型：

小鼠基因敲除技術獲得2007年諾貝爾獎，該技術采用基因工程、細胞工程、雜交等手段使小鼠體內的某一基因失去功能，以研究基因在生物個體發(fā)育和病理過程中的作用。例如現(xiàn)有基因型為BB的小鼠，要敲除基因B，可先用體外合成的突變基因b取代正�；駼，使BB細胞改變?yōu)锽b細胞，最終培育成為基因敲除小鼠。

（1）體外獲得突變基因b的克隆的技術稱_________________。

（2）基因敲除過程中的受體細胞是__________________細胞。外源基因是否導入受體細胞，可利用重組質粒上的            檢測。

（3）將導入目的基因的受體細胞進行克隆，在某時期提取細胞培養(yǎng)液，測定每個細胞的DNA含量，結果如下圖。在圖中的B、C、D中，表示處于G2和M期的是     ，在_______期進行作物（小麥、水稻）誘變育種工作實踐可取得良好效果的是。

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科目：高中生物 來源：2010屆湖南省湘潭市高三第三次模擬考試理科綜合試題生物部分 題型：綜合題

小鼠基因敲除技術2007年獲諾貝爾獎。80年代初胚胎干細胞的分離和體外培養(yǎng)的成功奠定了基因敲除的技術基礎，87年Thompsson首次建立了完整的ESC基因敲除技術的模型，此后幾年中基因敲除技術得到了進一步的發(fā)展和完善，其技術路線如下。

①胚胎干細胞的獲得；

②構建重組基因表達載體；

③用一定方法把重組DNA轉入受體細胞內；

④用一定培養(yǎng)基篩選已擊中的細胞；

⑤將擊中的細胞轉入胚胎，通過胚胎移植使其生長為轉基因動物，然后對該動物進行形態(tài)觀察和分子生物學檢測。

異源抗體用于人體容易發(fā)生排異反應，若將動物抗體分子基因敲除，代之以人的抗體分子基因，那么人源抗體的產生將迎刃而解。根據上述材料回答下列問題：

（1）構建重組載體過程中，為使導人的目的基因能完成表達，需要在目的基因的首端和尾端各插入               ；

（2）上述過程中所需的胚胎通常通過供體獲得，再將處理過的胚胎移植到受體內培養(yǎng)，則胚胎移植前要對供體和受體進行               處理，若想培養(yǎng)出多個性狀表現(xiàn)一致的個體，可通過               技術；

（3）應用基因敲除技術可讓動物生產人源抗體，通�？蓪膭游矬w內提取的細胞的抗體分子基因敲除，代之以人的抗體分子基因，然后將該細胞通過細胞融合技術與骨髓瘤細胞融合，再通過               、               等過程篩選出能產生人源抗體的細胞群，再在培養(yǎng)液或小鼠腹腔進行培養(yǎng)，從而獲得所需抗體；

（4）用培養(yǎng)基篩選重組載體是否已擊中細胞，方法之一是啟動子缺失篩選法：原理是在重組載體的目的片段中插入一個啟動子缺失的正向選擇基因，同時目的基因片段也不包含該基因的啟動子序列。若基因載體和細胞基因組發(fā)生同源重組，則正向選擇基因可以在靶位點基因啟動子的作用下得以表達，使陽性細胞具有G418抗性（G418是一種細胞毒性藥物，對細胞有抑制或殺傷作用），從而從培養(yǎng)基中得到所需要的陽性克隆細胞，根據上述原理篩選導入成功的細胞的基本方法或過程是               。

 

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科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解

小鼠基因敲除技術2007年獲諾貝爾獎。80年代初胚胎干細胞的分離和體外培養(yǎng)的成功奠定了基因敲除的技術基礎，87年Thompsson首次建立了完整的ESC基因敲除技術的模型，此后幾年中基因敲除技術得到了進一步的發(fā)展和完善，其技術路線如下。

①胚胎干細胞的獲得；

②構建重組基因表達載體；

③用一定方法把重組DNA轉入受體細胞內；

④用一定培養(yǎng)基篩選已擊中的細胞；

⑤將擊中的細胞轉入胚胎，通過胚胎移植使其生長為轉基因動物，然后對該動物進行形態(tài)觀察和分子生物學檢測。

異源抗體用于人體容易發(fā)生排異反應，若將動物抗體分子基因敲除，代之以人的抗體分子基因，那么人源抗體的產生將迎刃而解。根據上述材料回答下列問題：

（1）構建重組載體過程中，為使導人的目的基因能完成表達，需要在目的基因的首端和尾端各插入               ；

（2）上述過程中所需的胚胎通常通過供體獲得，再將處理過的胚胎移植到受體內培養(yǎng)，則胚胎移植前要對供體和受體進行               處理，若想培養(yǎng)出多個性狀表現(xiàn)一致的個體，可通過               技術；

（3）應用基因敲除技術可讓動物生產人源抗體，通�？蓪膭游矬w內提取的細胞的抗體分子基因敲除，代之以人的抗體分子基因，然后將該細胞通過細胞融合技術與骨髓瘤細胞融合，再通過               、               等過程篩選出能產生人源抗體的細胞群，再在培養(yǎng)液或小鼠腹腔進行培養(yǎng)，從而獲得所需抗體；

（4）用培養(yǎng)基篩選重組載體是否已擊中細胞，方法之一是啟動子缺失篩選法：原理是在重組載體的目的片段中插入一個啟動子缺失的正向選擇基因，同時目的基因片段也不包含該基因的啟動子序列。若基因載體和細胞基因組發(fā)生同源重組，則正向選擇基因可以在靶位點基因啟動子的作用下得以表達，使陽性細胞具有G418抗性（G418是一種細胞毒性藥物，對細胞有抑制或殺傷作用），從而從培養(yǎng)基中得到所需要的陽性克隆細胞，根據上述原理篩選導入成功的細胞的基本方法或過程是               。

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