Question

【題目】據(jù)報(bào)道某實(shí)驗(yàn)室在海泥中分離純化得到多株海洋嗜鹽細(xì)菌，經(jīng)篩選發(fā)現(xiàn)其中某種嗜鹽菌能產(chǎn)生胡蘿卜素。某微生物興趣小組進(jìn)行了如下的探究和分析，請(qǐng)據(jù)此回答以下問題：

（1）該小組用接種海泥的某種固體培養(yǎng)基獲得海洋嗜鹽細(xì)菌，所用的培養(yǎng)基從功能上看，屬于__________培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基的成分中__________的含量應(yīng)該比通用培養(yǎng)基高。

（2）在海泥中獲得產(chǎn)生胡蘿卜素的嗜鹽菌后，可用______________________________方法進(jìn)行分離和純化。 純化得到的菌株需要長期保存，可采用_______________方法。

（3）為了探究該菌的最適生長條件，小組決定分組培養(yǎng)并用活菌計(jì)數(shù)法（間接計(jì)數(shù)法）對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)?/span>______________________________________________。最終選取菌落數(shù)在30~300間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，大于300個(gè)菌落的平板不參與計(jì)數(shù)的原因是_______。

（4）提取和鑒定上述分離純化所得的細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生的物質(zhì)應(yīng)選用_________(蒸餾、萃取)法，原因是_________________________________________________________________________(答兩點(diǎn))。

Answer 1

【答案】 選擇 無機(jī)鹽 平板劃線法或稀釋涂布平板法 甘油管藏 兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 多于300，菌落重疊的概率大，將產(chǎn)生較大誤差 萃取 胡蘿卜素不易揮發(fā)，易溶于有機(jī)容劑

【解析】試題分析：為了篩選嗜鹽菌，需要用含無機(jī)鹽量比普通培養(yǎng)基高的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。為了分離、純化選擇培養(yǎng)的微生物，可選平板劃線法或稀釋涂布平板法接種。若還要進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，則一般選用稀釋涂布平板法。由于該種方法培養(yǎng)時(shí)，常常有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起形成一個(gè)菌落，所以估算得到的數(shù)值都要比實(shí)際值偏小，但為了更接近真實(shí)值，一般要選菌落數(shù)在30-300個(gè)之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，這樣可避免菌落未充分生長或者重疊的概率過大而產(chǎn)生較大誤差。

(1)該培養(yǎng)基的作用是篩選獲得海洋嗜鹽細(xì)菌，屬于選擇培養(yǎng)基；因?yàn)橐�篩選的是嗜鹽細(xì)菌，所以培養(yǎng)基的成分中無機(jī)鹽的含量應(yīng)該比通用培養(yǎng)基高。

(2)分離和純化微生物常用平板劃線法或稀釋涂布平板法。長期保存菌種，可采用甘油管藏法。

(3) 菌落培養(yǎng)時(shí)，由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，而在平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。計(jì)數(shù)時(shí)，若菌落數(shù)目多于300，則菌落重疊的概率大，將產(chǎn)生較大誤差，因此最終選取菌落數(shù)在30～300間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，大于300個(gè)菌落的平板不參與計(jì)數(shù)。

(4)嗜鹽菌能產(chǎn)生胡蘿卜素，而胡蘿卜素不易揮發(fā)，易溶于有機(jī)容劑，因此提取胡蘿卜素應(yīng)選用萃取法。