Question

9．長期使用除草劑會污染環(huán)境，研究發(fā)現(xiàn)一除草劑（有機物）能被土壤中某細菌（M）降解．如圖為分離能降解該除草劑的M菌種的過程．請回答下列相關問題：

（1）在液態(tài)培養(yǎng)基的基礎上制備固體培養(yǎng)基時常用的凝固劑是瓊脂．
（2）土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱．為了獲取能降解該除草劑的M菌種，選擇的土壤樣品應來自
該除草劑嚴重污染的土壤．圖中①過程所用的培養(yǎng)基中需要加入該除草劑作為唯一碳源．進行選擇培養(yǎng)的目的是增加目的菌的濃度．
（3）圖中②過程劃線所用的工具為接種環(huán)，該工具在使用前后都要進行灼燒滅菌．
（4）若要檢測土樣中的細菌含量，應采用稀釋涂布平板法進行接種．先將1mL土壤溶液稀釋100倍，然后隨機選取4個經滅菌處理的平板，其中3個平板上分別涂布0.1mL稀釋液，1個平板未涂布稀釋液，適當培養(yǎng)后，4個平板上的菌落數(shù)分別為39、38、37和0，則可計算得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)為3.8×10⁷個．

Answer 1

分析 1、無菌技術的主要內容
①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；
④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）在液態(tài)培養(yǎng)基的基礎上，制備固體培養(yǎng)基時需要用瓊脂作為凝固劑．
（2）根據(jù)題意可知，“研究發(fā)現(xiàn)一除草劑（有機物）能被土壤中某細菌（M）降解”，因此為了獲取能降解該除草劑的M菌種，選擇的土壤樣品應來自該除草劑嚴重污染的土壤．圖中①過程為選擇培養(yǎng)，因此所用的培養(yǎng)基中需要加入該除草劑作為唯一碳源．進行選擇培養(yǎng)的目的是增加目的菌的濃度．
（3）圖中②過程表示平板劃線法，劃線一般用接種環(huán)，該工具在使用前后都要進行灼燒滅菌．
（4）若要檢測土樣中的細菌含量，應采用稀釋涂布平板法進行接種．用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內，至少要涂布3個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細菌總數(shù)，可計算得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)為=（39+38+37）÷3÷0.1×100×1000=3.8×10⁷個．
故答案為：
（1）瓊脂
（2）該除草劑嚴重污染的土壤    該除草劑   增加目的菌的濃度
（3）接種環(huán)       灼燒
（4）稀釋涂布平板        3.8×10⁷

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生掌握培養(yǎng)基的配制方法以及成分，識記無菌技術的主要內容，掌握平板劃線法和稀釋涂布平板法的操作步驟以及應用．