Question

化學(xué)降解法是一種傳統(tǒng)的測(cè)定DNA分子堿基序列的方法，具體操作過程如下圖：

(1)由待測(cè)序的DNA片段獲得DNA單鏈的方法是??????? ，圖中特定化學(xué)試劑的作用是破壞DNA單鏈在某種特定堿基處的?????? 鍵。

(2)電泳時(shí)，電泳槽內(nèi)先要加入????????????? ，再將處理好的不同長(zhǎng)度的DNA片段樣品加入點(diǎn)樣孔，利用待分離樣品中各分子的帶電性質(zhì)，以及分子__???????? __、形狀的不同，使它們?cè)陔妶?chǎng)作用下產(chǎn)生不同的???????? ，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各分子的分離和鑒定。

(3)從理論上分析，要想測(cè)出圖中該DNA片段的全部堿基序列，按以上模式操作至少???????? 次。

(4)若想進(jìn)一步判定該DNA片段中是否含有某基因，可用基因探針檢測(cè)。探針的制備是取某基因的???????? 條鏈，并作 ??????????? 。

 

Answer 1

【答案】

⑴用解旋酶（或95℃高溫）處理待測(cè)DNA片段???? 磷酸二酯 ⑵緩沖液?????? （本身）大小???? 遷移速度?? ⑶ 3 ⑷一???? 放射性同位素標(biāo)記

【解析】

試題分析：（1）用DNA解旋酶或高溫處理能將DNA解旋獲得DNA單鏈。圖中特定化學(xué)試劑的作用是切割DNA單鏈，獲得DNA判斷，是作用于DNA骨架的磷酸和脫氧核糖之間的磷酸二酯鍵。

（2）電泳時(shí)，電泳槽內(nèi)先要加入緩沖液。利用待分離樣品中各分子的帶電性質(zhì)，以及分子（本身）大小、形狀的不同，使它們?cè)陔妶?chǎng)作用下產(chǎn)生不同的遷移速度，實(shí)現(xiàn)樣品中各分子的分離和鑒定。

（3）按照?qǐng)D示方式1次可以測(cè)定1種堿基排序，3次可以測(cè)定3種堿基排序，前面3種堿基排序確定，第4種堿基排序也隨之確定，故至少需要操作3次。

（4）基因探針是取某基因的1條鏈，用放射性同位素標(biāo)記或熒光標(biāo)記。

考點(diǎn)：本題考查化學(xué)降解法相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能力。