Question

現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學物質(zhì)，實驗室研究人員欲通過動物細胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強弱。請你以一個研究人員的身份參與此項研究，完成下列實驗報告并回答有關(guān)問題。?

【實驗原理】有毒物質(zhì)能誘導細胞產(chǎn)生變異，根據(jù)這種變異細胞占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)（以下稱Q值），可判斷該化學物質(zhì)的毒性。?

【實驗材料】活的小白鼠胚胎。?

【藥品用具】胰蛋白酶液、動物細胞培養(yǎng)液、動物細胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、培養(yǎng)瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常體細胞有絲分裂各時期高倍顯微照片。?

【實驗步驟】?

（1）制備細胞懸浮液：把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入        處理，使胚胎組織分散成單個細胞，再加入動物細胞培養(yǎng)液，制成細胞懸浮液。

（2）進行細胞培養(yǎng)：?

①取A、B、C三個潔凈的培養(yǎng)瓶，         ，加入等量的細胞懸浮液。

②向A培養(yǎng)瓶中加入化學物質(zhì)甲，向B培養(yǎng)瓶中加入          ，向C瓶內(nèi)加入等量的生理鹽水，并將培養(yǎng)瓶搖勻。?

③在實驗中，C培養(yǎng)瓶起什么作用？              。

（3）制作臨時裝片?

①當細胞增殖到大約第8代左右時，同時從恒溫箱中取出三個培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，使培養(yǎng)的細胞          ，再加入動物細胞固定液以便迅速殺死細胞并固定細胞。?

②靜置一段時間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央，用                  染色，3～5 min后，蓋上蓋玻片。?

（4）鏡檢和統(tǒng)計?

把臨時裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于      期的細胞，并與C組對比以確認發(fā)生變異的細胞，同時統(tǒng)計                     。

【結(jié)果與結(jié)論】?

經(jīng)研究人員實驗得知：A、B、C三個培養(yǎng)瓶的Q值依次為：Q_A=1.3%、Q_B=12.5%、Q_C=0.1%，由此可知該實驗的結(jié)論是                                。   

 

Answer 1

【答案】

（1）胰蛋白酶液；?

（2）消毒滅菌；等量的化學物質(zhì)乙（2分）；對照；

（3）從瓶壁上脫落；適宜濃度的龍膽紫溶液；

（4）細胞有絲分裂中期；該期變異的細胞占該期細胞總數(shù)的百分數(shù)（Q值）；

實驗的結(jié)論是：甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲

【解析】（1）胰蛋白酶能夠使動物組織分散成單個細胞。

（2）培養(yǎng)瓶在加入培養(yǎng)液前需消毒滅菌，該實驗的自變量是有毒物質(zhì)的有無以及濃度，因變量是染色體的變異情況，所以需向三個培養(yǎng)瓶中加入等量的細胞懸浮液，并放在相同適宜溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。檢測染色體的方法是龍膽紫染液。

（4）QA>QC、QB>QC，說明甲、乙兩種化學物質(zhì)均有毒性，QB>QA，說明乙的毒性大于甲。C瓶起對照作用，C瓶中Q值>0，說明動物細胞在正常培養(yǎng)狀態(tài)下變異頻率很低。