Question

18．富集培養(yǎng)的微生物學(xué)中的最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一．主要是指利用不同微生物間生命活動特點的不同，制定環(huán)境條件，是僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物．富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點，從物理、化學(xué)、生物及綜合多個方面進(jìn)行選擇，如溫度、PH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營養(yǎng)等許多方面．下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程．利用富集培養(yǎng)技術(shù)從土壤中分離能降解對羥基苯甲酸的微生物請分析回答：

（1）本實驗所需培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基碳源為對羥基苯甲酸．
（2）實驗原理是利用以對羥基苯甲酸為唯一的碳源選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物．
（3）①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是增大分解對羥基苯甲酸微生物的比例．
（4）⑤的菌落中大部分是降解對羥基苯甲酸微生物．
（5）⑥為對照組，⑦為實驗組，設(shè)置⑥的目的是說明通過富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物．
（6）⑤→⑥采用單細(xì)胞挑取法，接種到⑥的培養(yǎng)基中，在操作過程中為防止污染應(yīng)注意的事項是接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻，同時打開皿蓋挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物．

Answer 1

分析 選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同．有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；不同微生物對某些化學(xué)藥品的抵抗力不同．利用這些特點，我們便可配制出適于某些微生物生長而抑制其他微生物的選擇培養(yǎng)基．例如從土壤中分離放線菌時，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細(xì)菌和真菌的生長；如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽．

解答 解：（1）本實驗所用培養(yǎng)基是以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．
（2）實驗原理是利用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物．
（3）①②③重復(fù)培養(yǎng)的目的是擴(kuò)大培養(yǎng)，以增大分解對羥基苯甲酸的微生物的比例．
（4）培養(yǎng)的微生物主要是能降解對羥基苯甲酸的微生物．⑥中沒有對羥基苯甲酸，⑦中含有對羥基苯甲酸，所以⑥是對照組，對照的目的是說明通過選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物．
（5）⑥中沒有對羥基苯甲酸，⑦中含有對羥基苯甲酸，所以⑥是對照組，對照的目的是說明通過選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物．
（6）最后通過設(shè)立對照及單菌落挑取法將培養(yǎng)基上的單菌落分別接種到含有對羥基苯甲酸及不含有該物質(zhì)的培養(yǎng)基上，驗證是否得到了目的菌株．在操作過程中為防止污染應(yīng)注意的事項是：接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻，同時打開皿蓋挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物．
故答案為：
（1）選擇培養(yǎng)基     對羥基苯甲酸
（2）利用以對羥基苯甲酸為唯一的碳源選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物
（3）增大分解對羥基苯甲酸微生物的比例
（4）對羥基苯甲酸
（5）對照  實驗  說明通過富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物
（6）單細(xì)胞挑取       接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻，同時打開皿蓋挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物

點評 本題考查微生物分離和培養(yǎng)，考查學(xué)生對選擇培養(yǎng)基的選擇作用的理解和應(yīng)用能力．注意，整個操作過程都應(yīng)是無菌操作，所用儀器和培養(yǎng)基都需滅菌，操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，接種環(huán)用完之后也要在火焰上灼燒以殺滅殘留微生物．