Question

【題目】[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題]（15分）

如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物，進(jìn)而生產(chǎn)可食用疫苗的部分過(guò)程示意圖，其中Psb I、Sma Ⅰ、EcoR Ⅰ、Apa Ⅰ為四種限制性核酸內(nèi)切酶。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）質(zhì)粒作為基因工程的載體，應(yīng)具備的基本條件有限制酶識(shí)別位點(diǎn)、帶標(biāo)記的基因和___________；將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞的常用方法是________________________。

（2）此實(shí)驗(yàn)中構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需用的限制酶是____________________，理由是____________________________________________________________。

（3）為鑒別受體細(xì)胞中是否含有抗原基因，可用添加卡那霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，若一受體細(xì)胞在檢測(cè)中對(duì)卡那霉素產(chǎn)生抗性但不能表達(dá)抗原物質(zhì)，可能的原因有_________________________、________________________。獲取含有插入抗原基因的重組質(zhì)粒的植物細(xì)胞后可用植物細(xì)胞工程中的____________技術(shù)獲取轉(zhuǎn)基因植株。

Answer 1

【答案】（15分，除標(biāo)明外，每空2分）

（1）能自我復(fù)制 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

（2）Pst Ⅰ、EcoR Ⅰ 限制酶Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ可將目的基因完整切割下來(lái)（3分）

（3）導(dǎo)入受體細(xì)胞的質(zhì)粒中不含抗原基因 重組質(zhì)粒中的抗原基因未在受體細(xì)胞中成功表達(dá) 植物組織培養(yǎng)

【解析】（1）質(zhì)粒作為基因工程的載體，應(yīng)具備的基本條件有限制酶識(shí)別位點(diǎn)、帶標(biāo)記基因和能自我復(fù)制。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞的常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。（2）此實(shí)驗(yàn)中構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要將目的基因完整切割下來(lái)，所以要用到限制酶Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ。（3）一受體細(xì)胞在檢測(cè)中對(duì)卡那霉素產(chǎn)生抗性但不能表達(dá)抗原物質(zhì)，可能的原因有導(dǎo)入受體細(xì)胞的質(zhì)粒中不含抗原基因或重組質(zhì)粒中的抗原基因未在受體細(xì)胞中成功表達(dá)。通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植株。