3.大腸桿菌Puc18質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體.某限制酶在此質(zhì)粒上的唯一酶切位點(diǎn)位于LacZ基因中,如果沒(méi)有插入外源基因,LacZ基因便可表達(dá)出β一半乳糖苷酶.當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時(shí),X-gal便會(huì)被β-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落,反之,則形成白色菌落.如圖表示利用此質(zhì)粒實(shí)施基因工程的主要流程.

(1)已獲得的目的基因可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增.
(2)目的基因插入質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中,需要DNA連接酶恢復(fù)磷酸二酯鍵.
(3)將試管I中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是進(jìn)行轉(zhuǎn)化;大腸桿菌需事先用Ca2+進(jìn)行處理,目的是使大腸桿菌細(xì)胞處于感受態(tài).
(4)將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)含有大腸桿菌必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水和生長(zhǎng)因子,還應(yīng)加入IPTG、X-gal以及氨芐青霉素,其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌.
(5)若觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn)白色菌落,則說(shuō)明大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒.如果作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則不利于重組質(zhì)粒的篩選,原因是無(wú)論大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,均會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色菌落.

分析 分析題圖:大腸桿菌pUC18質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因和LacZ基因,但限制酶的切割位點(diǎn)位于LacZ基因上,所以構(gòu)建成的重組質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因,但LacZ基因被破壞,不能產(chǎn)生β一半乳糖苷酶.試管Ⅰ中是基因表達(dá)載體,試管Ⅱ中是大腸桿菌,將試管I中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是進(jìn)行轉(zhuǎn)化,最后用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選.

解答 解:(1)PCR技術(shù)能在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因,所以已獲得的目的基因可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增.
(2)DNA連接酶連接形成的是磷酸二酯鍵.
(3)將試管I中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是使目的基因進(jìn)人受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá),即進(jìn)行轉(zhuǎn)化;大腸桿菌需事先用Ca2+進(jìn)行處理,增大細(xì)胞壁的通透性,使之處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài).
(4)將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)含有大腸桿菌必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水和生長(zhǎng)因子,還應(yīng)加入IPTG、X-gal以及氨芐青霉素;由于質(zhì)粒上含有氨芐青霉素抗性基因,因此導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌能抗氨芐青霉素,所以培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素的作用是篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌.
(5)重組質(zhì)粒上的LacZ基因被破壞,不能產(chǎn)生β一半乳糖苷酶,若大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒,則其在含有IPTG和X-gal的培養(yǎng)基中形成白色菌落.如果作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則無(wú)論大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,均會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色菌落.
故答案為:
(1)PCR
(2)磷酸二酯
(3)進(jìn)行轉(zhuǎn)化            使大腸桿菌細(xì)胞處于感受態(tài)
(4)碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水              導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌
(5)白          無(wú)論大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,均會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色菌落

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合流程圖,考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記基因工程的具體操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié),能結(jié)合題中和圖中信息準(zhǔn)確答題,屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查.

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題

16.下列關(guān)于幾種常見(jiàn)育種方法的敘述,不正確的是( 。
A.在雜交育種中,一般從F2開(kāi)始選種,因?yàn)閺腇2開(kāi)始發(fā)生性狀分離
B.在單倍體育種中,常先篩選F1花粉類型再分別進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)
C.誘變育種提高了育種的效率和選擇范圍,但具有盲目性
D.育種過(guò)程中種群的基因頻率發(fā)生定向改變

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題

14.下列關(guān)于人體細(xì)胞呼吸的相關(guān)敘述,正確的是( 。
A.有氧呼吸過(guò)程中,CO2的生成與H2O的利用不在同一階段
B.有氧呼吸過(guò)程中,葡萄糖進(jìn)入線粒體后才能分解為CO2和H2O
C.無(wú)法通過(guò)是否產(chǎn)生CO2來(lái)判斷細(xì)胞呼吸方式
D.等質(zhì)量的脂肪和糖類完全氧化分解產(chǎn)生CO2與吸收O2的比值后者高

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:解答題

11.過(guò)去20年間,伴隨轉(zhuǎn)基因作物的商業(yè)化進(jìn)程,全球?qū)υ摷夹g(shù)的應(yīng)用急劇增加,從而也引發(fā)了人們關(guān)丁轉(zhuǎn)基因食品安全的擔(dān)憂和討論.農(nóng)業(yè)部發(fā)言人證實(shí)到目前為止我國(guó)批準(zhǔn)商業(yè)化種植和生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因作物,只有轉(zhuǎn)基因抗蟲的棉花和轉(zhuǎn)基因抗病毒的番木瓜這兩種.下圖是從酵母菌獲取某植物需要的某種酶基因的流程,結(jié)合所學(xué)知識(shí)及相關(guān)信息 回答下列問(wèn)題:

(1)圖中cDNA文庫(kù)小于基因組文庫(kù)(填“大于”、“等于”或“小于”).
(2)①過(guò)程提取的DNA需要限制酶酶,B過(guò)程是反轉(zhuǎn)錄(逆轉(zhuǎn)錄).
(3)為在短時(shí)間內(nèi)獲得大量目的基因,可用PCR技術(shù)(4)擴(kuò)增的方法,其原理是DNA復(fù)制.
(4)目的基因獲取之后,需要進(jìn)行基因表達(dá)載體的構(gòu)建,其組成必須有啟動(dòng)子、終止子、目的基因以及標(biāo)記基因等.此步驟是基因工程的核心.
(5)將該目的基因?qū)肽畴p子葉植物細(xì)胞,常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因是否整合到植物細(xì)胞的染色體上,可以用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè).

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題

18.下列有關(guān)生命活動(dòng)的敘述中,錯(cuò)誤的是( 。
A.原核細(xì)胞和真核細(xì)胞進(jìn)行翻譯的細(xì)胞器不同
B.光合作用和化能合成作用中合成有機(jī)物的能量來(lái)源不同
C.有氧呼吸和無(wú)氧呼吸過(guò)程中丙酮酸的消耗途徑不同
D.促進(jìn)果實(shí)發(fā)育和促進(jìn)果實(shí)成熟所需要的植物激素不同

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題

8.人體內(nèi)下列生理活動(dòng)是單向的是(( 。
A.甲狀腺細(xì)胞與胰島β細(xì)胞間的作用
B.肝細(xì)胞中糖元與葡萄糖的轉(zhuǎn)化
C.下丘腦神經(jīng)分泌細(xì)胞與腺垂體之間的激素調(diào)節(jié)
D.刺激離體神經(jīng)纖維產(chǎn)生的興奮傳導(dǎo)方向

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:解答題

15.生產(chǎn)生活中的很多措施是為了獲得健康安全的食品,防止或減少污染.
(1)圖1為水體富營(yíng)養(yǎng)化程度對(duì)藻類種群數(shù)量的影響的研究結(jié)果,以便為養(yǎng)魚戶提供恰當(dāng)?shù)闹笇?dǎo).魚鱗藻、脆桿藻為藻類植物,是魚的優(yōu)良餌料,微囊藻屬于藍(lán)藻,其產(chǎn)生的毒素污染水體.

由上圖分析可知,當(dāng)水體營(yíng)養(yǎng)化程度處于中營(yíng)養(yǎng)化時(shí),有利于能量流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠郑孱愇誑元素主要用于何處蛋白質(zhì)、核酸(DNA、RNA)等大分子物質(zhì).(至少填2個(gè))
(2)采集湖邊的桑樹(shù)葉做以下流程的實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為每1cm2葉片的重量(mg)變化情況(均只考慮有機(jī)物的重量變化).
葉片重量(M)$\stackrel{無(wú)光處理1h}{→}$葉片重量(M-X)$\stackrel{光照處理1h}{→}$葉片重量(M+Y)
據(jù)上面數(shù)據(jù)分析,該植物的實(shí)際光合速率等于(填“小于”、“等于”或“大于”)(Y+2X)mg/cm2•h.光照下桑樹(shù)葉肉細(xì)胞內(nèi)能合成ATP的場(chǎng)所有細(xì)胞溶膠、線粒體、葉綠體.
(3)在使用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑制作豆芽時(shí)也要考慮人們的食用健康安全問(wèn)題.某興趣小組用不同濃度的生長(zhǎng)素(實(shí)驗(yàn)一)、乙烯利(為乙烯類似物)(實(shí)驗(yàn)二)分別處理剛開(kāi)始發(fā)芽的大豆芽,三天后觀察到的胚軸生長(zhǎng)情況依次如2圖甲、乙(“-”表示未用激素處理,“+”表示用相應(yīng)的激素處理,“+”越多激素濃度越高).
①若實(shí)驗(yàn)一是探究生長(zhǎng)素促進(jìn)胚軸伸長(zhǎng)的最適濃度的預(yù)實(shí)驗(yàn),則在正式實(shí)驗(yàn)時(shí),不需要(需要/不需要)設(shè)計(jì)不用生長(zhǎng)素的空白對(duì)照組.
②已知生長(zhǎng)素能影響乙烯合成,通過(guò)比較實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可以推測(cè)出較高濃度的生長(zhǎng)素能促進(jìn)(促進(jìn)/抑制)乙烯的合成.
③某種二萜類酸能促進(jìn)某些植物開(kāi)花、莖伸長(zhǎng)等多種效能,該物質(zhì)應(yīng)屬于赤霉素類植物激素.

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:解答題

11.小麥?zhǔn)侵匾募Z食作物,小麥品種是純合子,通過(guò)自花授粉繁殖后代.下圖是小麥遺傳育種的一些途徑.請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)以矮稈易感。╠drr)和高稈抗。―DRR)小麥為親本進(jìn)行雜交,培育矮稈抗病小麥品種過(guò)程中,F(xiàn)1自交產(chǎn)生F2,F(xiàn)2中矮稈抗病類型出現(xiàn)的比例是$\frac{3}{16}$,選F2矮稈抗病類型連續(xù)自交、篩選,直至不再發(fā)生性狀分離為止.
(2)圖中JK途徑表示的是多倍體育種.此育種常用的方法是用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗.
(3)若要在較短時(shí)間內(nèi)獲得上述(矮稈抗病)品種小麥,可選圖中EFG(填字母)途徑所用的育種.此育種方法的過(guò)程是花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素加倍,主要依據(jù)的原理是植物細(xì)胞全能性和染色體變異.

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題

10.一對(duì)夫婦生了一對(duì)“龍鳳”雙胞胎,其中男孩正常,女孩色盲.這夫婦的基因型是( 。
A.XbY  XBXBB.XBY  XBXbC.XBY  XbXbD.XbY  XBXb

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同步練習(xí)冊(cè)答案