Question

【題目】釀酒酵母普遍應(yīng)用于白酒、紅酒、啤酒和果汁飲料的生產(chǎn)，其生物合成過程會(huì)形成多種多樣的代謝產(chǎn)物，從而對(duì)食品風(fēng)味產(chǎn)生重要影響。以下是從酒曲樣品中分離出酵母菌的過程：

處理酒曲樣品→過濾→系列稀釋至10-2—10-7→選擇適宜稀釋度→涂布固體培養(yǎng)基→28℃下培養(yǎng)48h→挑取典型菌落→鏡檢→菌種鑒定→菌種保藏。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：

（1）制備固體培養(yǎng)基時(shí)，采用___________法滅菌15min~20min。

（2）通過稀釋涂布平板法可以統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇的稀釋濃度要保證涂布后在培養(yǎng)基表面形成___________。涂布平板操作時(shí)應(yīng)在___________附近進(jìn)行。

（3）菌種鑒定后要進(jìn)行菌種保藏，具體方法是：將菌種接種于固體斜面培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)后，將試管于4℃的冰箱保存。這種方法保存的時(shí)間不長(zhǎng)，菌種容易___________。若想長(zhǎng)期保藏，可以采用___________的方法，放在___________的冷凍箱中保存。

（4）酵母菌常用于制作葡萄酒，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在___________，常用___________檢測(cè)發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 單個(gè)菌落 酒精燈火焰 被污染或產(chǎn)生變異 甘油管藏 -20℃ 18-25℃ 重鉻酸鉀

【解析】

實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法：

1、灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇�。此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰灼燒來滅菌。

2、干熱滅菌：將滅菌物品放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃加熱1～2h可達(dá)到滅菌目的。能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以用這種方法滅菌。

3、高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min，如培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿。

（1）對(duì)培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。

（2）通過稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目時(shí)，為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇的稀釋濃度要保證涂布后在培養(yǎng)基表面形成單菌落。涂布平板操作時(shí)為防止雜菌污染，應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。

（3）將菌種接種于固體斜面培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)后，將試管于4℃的冰箱保存。這種方法是臨時(shí)保藏法，其保存的時(shí)間不長(zhǎng)，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。若想長(zhǎng)期保藏，可以采用甘油管藏的方法，放在-20℃的冷凍箱中保存。

（4）酵母菌常用于制作葡萄酒，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18-25℃，常用酸性重鉻酸鉀檢測(cè)發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生。