Question

【題目】類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是一種自身免疫病，致殘性強(qiáng)。研究表明，該病的病理改變與腫瘤壞死因子-α（TNF-α）密切相關(guān)，而一種人鼠嵌合的抗TNF-α單克隆抗體能有效治療RA。下圖為該單克隆抗體制備過程示意圖。

（1）圖中的抗原A是______________，HAT培養(yǎng)基的作用是_______________。將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞具有的特點(diǎn)是_______________。

（2）醫(yī)療上，把單克隆抗體與化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合制成“___________”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細(xì)胞并將其殺死。

（3）單克隆抗體的特點(diǎn)是__________、_____________、可大量制備。單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的________技術(shù)和_________技術(shù)。

Answer 1

【答案】腫瘤壞死因子-α（或TNF-α）篩選出雜交瘤細(xì)胞既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體生物導(dǎo)彈特異性強(qiáng)靈敏度高動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞培養(yǎng)

【解析】

本題考查細(xì)胞工程，考查單克隆抗體的制備流程及其應(yīng)用，解答此題，可根據(jù)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體、骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖分析注射抗原的原因和雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)，根據(jù)細(xì)胞融合的隨機(jī)性分析HAT培養(yǎng)基的作用。

（1）制備抗TNF-α單克隆抗體，首先應(yīng)向小鼠體內(nèi)注射抗原TNF-α，刺激小鼠體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞增殖分化，產(chǎn)生能分泌抗TNF-α抗體的漿細(xì)胞。由于B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞在融合時是隨機(jī)的，且不會100%發(fā)生融合，融合體系中存在B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和未融合的細(xì)胞，因此需要通過HAT培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞具備了B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的特點(diǎn)，既能無限增殖，又能產(chǎn)生單一抗體。

（2）利用抗體可以和抗原特異性結(jié)合的特點(diǎn)，把單克隆抗體與化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合，可以制成“生物導(dǎo)彈”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細(xì)胞并將其殺死。

（3）與血清抗體相比，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并且可大量制備的特點(diǎn)。圖示過程中涉及動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

項(xiàng)目	第一次篩選	第二次篩選
篩選 原因	誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞	由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以需經(jīng)過選擇性培養(yǎng)
篩選 方法	用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長	用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群
篩選 目的	得到雜交瘤細(xì)胞	得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞