Question

【題目】Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞�？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療，其技術(shù)流程如圖（圖中數(shù)字序號表示的是相關(guān)過程）。請回答下列有關(guān)問題：

(1)過程①利用的技術(shù)是_______________,過程②利用的技術(shù)是_______________,過程③中涉及到了基因工程技術(shù)，其中作為受體細(xì)胞的是_______________。

(2)過程③中獲取的目的基因是_______________，可以根據(jù)該基因的____________設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因片段。按此方法和圖示技術(shù)流程，完成 Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________________________和耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)等。

(3)圖中造血干細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)至少有 __________個(gè)來源。為檢測 Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì),用_________________進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。

Answer 1

【答案】 （體細(xì)胞）核移植 早期胚胎培養(yǎng) ES細(xì)胞 正常的Rag2基因 脫氧核苷酸序列(或堿基對序列或遺傳信息） 限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶 三 抗Rag2蛋白的抗體

【解析】試題分析：熟記并理解動物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植技術(shù)、基因工程的基本操作程序及其應(yīng)用等相關(guān)的基礎(chǔ)知識、形成清晰的知識網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上結(jié)合題意并從圖示中提取信息作答。

(1) 過程①是將培養(yǎng)的上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞形成重組細(xì)胞，進(jìn)而得到重組胚胎，因此利用的技術(shù)是（體細(xì)胞）核移植技術(shù)。過程②利用的是早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)。過程③是借助基因工程技術(shù)，將目的基因?qū)�入ES細(xì)胞，即作為受體細(xì)胞的是ES細(xì)胞。

(2) 過程③中獲取的目的基因是正常的Rag2基因。擴(kuò)增Rag2基因，需根據(jù)一段已知Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對序列或遺傳信息）設(shè)計(jì)引物。圖示中，獲得單個(gè)的上皮細(xì)胞需用胰蛋白酶；在將正常的Rag2基因?qū)�入ES細(xì)胞前需要用到限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因片段的過程中離不開耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)等酶。

(3) 圖中造血干細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)至少有三個(gè)來源，分別是Rag2基因缺失小鼠的上皮細(xì)胞的核基因、卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因和目的基因是（正常的Rag2基因）。為檢測 Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。