Question

4．如表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請回答有關(guān)問題：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	蒸餾水
在1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	定容1000mL

（1）根據(jù)配方可知該培養(yǎng)基只允許分解尿素的細菌生長，從功能上看，這種培養(yǎng)基被稱作選擇培養(yǎng)基．為防止雜菌污染，對培養(yǎng)基采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．
（2）若要通過統(tǒng)計培養(yǎng)基中菌落數(shù)來估計樣品中的細菌數(shù)，上述培養(yǎng)基中還需要添加凝固劑（或瓊脂），接種時應采用稀釋涂布平板法．該方法接種培養(yǎng)后的菌落如圖，其中適合用于計數(shù)的平板是C．

（3）某同學涂布平板時用0．lmL稀釋液，稀釋液的稀釋倍數(shù)為10⁵，平板中測得菌落數(shù)的平均值為163，則每1mL樣品中的細菌數(shù)約是1.63×l0⁸個．從土壤中分離出分解尿素的細菌后，要對其作進一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入相應的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長．
2、稀釋涂布平板法計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)．

解答 解：（1）該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，只允許分解尿素的細菌生長，故這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基．培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（2）若要通過統(tǒng)計培養(yǎng)基中菌落數(shù)來估計樣品中的細菌數(shù)，需用固體培養(yǎng)基，故上述培養(yǎng)基中還需要添加瓊脂作為凝固劑，接種時應采用稀釋涂布平板法法．用稀釋涂布平板法測定細菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進行記數(shù)，因此圖中C平板適合用于計數(shù)．
（3）某同學涂布平板時用0．lmL稀釋液，稀釋液的稀釋倍數(shù)為10⁵，平板中測得菌落數(shù)的平均值為163，則每1mL樣品中的細菌數(shù)約=163÷0.1×10⁵=1.63×l0⁸個．從土壤中分離出分解尿素的細菌后，要對其作進一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑．
故答案為：
（1）尿素     選擇     高壓蒸汽滅菌
（2）凝固劑（或瓊脂）      稀釋涂布平板法    C
（3）1.63×l0⁸ 酚紅指示劑

點評 本題考查了微生物培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識，考生要明確選擇培養(yǎng)基的選擇作用，識記培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分，識記常用的接種方法和具體操作過程，對于微生物培養(yǎng)技術(shù)的掌握及分解尿素的菌的分離和計數(shù)的掌握應用是解題的關(guān)鍵．