Question

【題目】英國(guó)PPL制藥公司通過(guò)不同的技術(shù)方法獲得轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物，讓其乳腺系統(tǒng)高效表達(dá)人凝血因子IX，以下為技術(shù)方法。

方法一：將相關(guān)調(diào)控組件重組在一起，通過(guò)一定的方法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，然后將受精卵送入母體內(nèi)，使其生長(zhǎng)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后，可通過(guò)其分泌的乳汁來(lái)生產(chǎn)所需藥品。

方法二：用已在小鼠中證明為可高效表達(dá)的人凝血因子Ⅸ轉(zhuǎn)基因構(gòu)件和新霉素抗性基因共轉(zhuǎn)染綿羊胎兒成纖維細(xì)胞，得到整合了上述兩種基因的成纖維細(xì)胞，以其作為核供體，獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，通過(guò)分泌的乳汁來(lái)生產(chǎn)所需藥品。

回答下列問(wèn)題：

（1）讓羊的乳腺系統(tǒng)通過(guò)分泌乳汁來(lái)生產(chǎn)所需藥品，這稱(chēng)為__________________________。

（2）方法一需要將人凝血因子Ⅸ基因與_________的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，通過(guò)____________技術(shù)導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中。

（3）方法二中新霉素抗性基因的作用是________________，要鑒定該基因轉(zhuǎn)染綿羊胎兒成纖維細(xì)胞是否成功需進(jìn)行的操作是___________________________。用動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞作為核供體可進(jìn)一步提高生產(chǎn)潛能，一般胚胎干細(xì)胞的來(lái)源是_________________________。

（4）與方法一相比，方法二的優(yōu)點(diǎn)是__________________________________。

Answer 1

【答案】乳腺（或乳房）生物反應(yīng)器 乳腺蛋白基因 顯微注射 作為標(biāo)記基因，對(duì)重組細(xì)胞進(jìn)行鑒定和篩選 將轉(zhuǎn)染后的綿羊胎兒成纖維細(xì)胞放在含有新霉素的選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，能正常生長(zhǎng)的細(xì)胞即為轉(zhuǎn)染成功的 早期胚胎或原始性腺 效率髙（或短時(shí)間內(nèi)獲得大量轉(zhuǎn)基因動(dòng)物）；核供體的細(xì)胞保證是整合了某一外源結(jié)構(gòu)基因的細(xì)胞，一旦核移植成功，就意味著得到了轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；將轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的篩選提前到細(xì)胞水平，而不是在動(dòng)物（個(gè)體）水平

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）通過(guò)動(dòng)物乳腺系統(tǒng)分泌乳汁生產(chǎn)藥品稱(chēng)為乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器。

（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體需要將目的基因和乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子重組在一起，將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射技術(shù)。

（3）新霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，對(duì)重組細(xì)胞進(jìn)行鑒定和篩選；鑒定基因轉(zhuǎn)染綿羊胎兒成纖維細(xì)胞是否成功可以將轉(zhuǎn)染后的綿羊胎兒成纖維細(xì)胞放在含有新霉素的選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，能正常生長(zhǎng)的細(xì)胞即為轉(zhuǎn)染成功的；一般胚胎干細(xì)胞來(lái)源于早期胚胎或原始性腺。

（4）方法二采用核移植技術(shù)，相比方法一效率髙（或短時(shí)間內(nèi)獲得大量轉(zhuǎn)基因動(dòng)物）；核供體的細(xì)胞保證是整合了某一外源結(jié)構(gòu)基因的細(xì)胞，一旦核移植成功，就意味著得到了轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；將轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的篩選提前到細(xì)胞水平，而不是在動(dòng)物（個(gè)體）水平。