Question

【題目】濱藜在含鹽量0．6%以上的條件下生長，是耐鹽堿基因開發(fā)的理想材料。若將濱藜的耐鹽堿基因轉(zhuǎn)移到水稻等農(nóng)作物體內(nèi)，將會大大提高水稻等農(nóng)作物的種植面積�；卮鹣铝袉栴}：

（1）從濱藜中獲得耐鹽堿基因需要用_____________酶處理，然后與含四環(huán)素抗性基因的Ti質(zhì)粒連接構(gòu)建___________，并導(dǎo)入農(nóng)桿菌。在含有四環(huán)素的固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是_________________________________________________________。

（2）用農(nóng)桿菌感染時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選用水稻_________（填“受傷的”或“完好的”）葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是__________________________________。

（3）導(dǎo)入耐鹽堿基因的植株細(xì)胞經(jīng)過________形成愈傷組織，然后__________形成胚狀體，繼續(xù)發(fā)育形成轉(zhuǎn)基因水稻幼苗。

（4）將生長至4葉期的轉(zhuǎn)基因幼苗轉(zhuǎn)入高濃度的NaCl溶液（含鹽量0．6%以上）中培養(yǎng)，進(jìn)行耐鹽實(shí)驗(yàn)，用非轉(zhuǎn)基因幼苗作為對照。培養(yǎng)30天后觀察兩者的存活率差異。若_________，則說明轉(zhuǎn)基因植株獲得了耐鹽特性。

Answer 1

【答案】限制性核酸內(nèi)切（或限制） 重組質(zhì)粒（或重組DNA分子） 篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌 受傷的 葉片傷口處的細(xì)胞釋放出大量酚類物質(zhì)，可吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞 脫分化 再分化 轉(zhuǎn)基因植株存活率高于非轉(zhuǎn)基因植株

【解析】

基因工程的工具酶有限制酶和DNA連接酶，基因工程的操作步驟：一是獲取目的基因；二是構(gòu)建基因表達(dá)載體（核心）；三是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（導(dǎo)入植物細(xì)胞一般有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管道法等）；四是檢測和鑒定目的基因（一是檢測目的基因是否導(dǎo)入成功，二是檢測目的基因是否成功表達(dá)，三是檢測目的基因控制的性狀是否能在植株上表現(xiàn)出來）。

（1）使用限制酶從濱藜中獲得耐鹽堿基因，與含抗生素抗性基因的Ti質(zhì)粒連接構(gòu)建基因表達(dá)載體（或重組質(zhì)粒），并導(dǎo)入農(nóng)桿菌，將其在含有四環(huán)素的固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。

（2）當(dāng)植物體受到損傷時(shí)，傷口處的細(xì)胞會分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞，因此用農(nóng)桿菌感染時(shí)，優(yōu)先選用水稻受傷的葉片。

（3）含有目的基因的植物細(xì)胞先脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成根、芽和胚狀體，然后繼續(xù)發(fā)育形成轉(zhuǎn)基因幼苗。

（4）將生長至4葉期的轉(zhuǎn)基因水稻幼苗轉(zhuǎn)入含鹽量0．6%以上的環(huán)境中培養(yǎng)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，用非轉(zhuǎn)基因幼苗作為對照。若轉(zhuǎn)基因植株存活率高于非轉(zhuǎn)基因植株，說明轉(zhuǎn)基因水稻植株獲得了耐鹽特性。