Question

【題目】列關(guān)于遺傳信息的傳遞與表達(dá)的問(wèn)題

為了探究基因在高等動(dòng)物體內(nèi)不同發(fā)育階段和不同類型的細(xì)胞中表達(dá)的持異性，通常以綠色熒光蛋白編碼基因(GFP)作為目的基因構(gòu)建轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。

（1）得GFP基因的方法一般包括____________和____________。

（2）使用限制酶PstI(識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖A所示）切開GFP，其產(chǎn)生的末端應(yīng)該為________。

（3）知圖B所示質(zhì)粒經(jīng)EcoRI和AatII聯(lián)合酶切后形成1.0kb和3.2 kb (1kb = 1000對(duì)堿基）兩種DNA片段，若將0.8 kb的單個(gè)基因插在質(zhì)粒的PstI位點(diǎn)處，所形成的重組質(zhì)粒用EcoRI和AatII聯(lián)合酶切后，能形成兩種DNA片段，其大小應(yīng)分別為___________kb和___________kb。

（4）上述重組質(zhì)粒導(dǎo)入小鼠受精卵雄性原核中的常規(guī)方法是______________________。

（5）上述受精卵移植發(fā)育而成且頭部發(fā)熒光的轉(zhuǎn)基因小鼠中，全身各種組織或細(xì)胞均含有的物質(zhì)是______________________。

①GFP基因 ②GFPmRNA ③GFP蛋白

A.① B.①② C.②③ D.①②③

Answer 1

【答案】 從相關(guān)生物細(xì)胞中分離 人工化學(xué)合成 D 1.8 3.2 顯微注射 A

【解析】（1）獲得目的基因的方法有從相關(guān)生物細(xì)胞中分離和人工化學(xué)合成。

（2）根據(jù)圖20 A所給出的PstI識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，使用限制酶PstI切開GFP，其產(chǎn)生的末端應(yīng)該為與選項(xiàng)中D吻合，所以選D。

（3）根據(jù)圖20 B和題意“質(zhì)粒經(jīng)EcoRI和AatII聯(lián)合酶切后形成1.0kb和3.2 kb兩種DNA片段”可推知，其中所得到的1.0kb的DNA片段才是包含PstI酶切位點(diǎn)的片段。如果把目的基因（0.8kb）插入到PstI酶切位點(diǎn)處，則用EcoRI和AatII聯(lián)合酶切質(zhì)粒后形成DNA片段大小分別為1.0+0.8=1.8kb和3.2kb。

（4）將目的基因?qū)�入�?dòng)物受精卵的常用方法是顯微注射法。

（5）轉(zhuǎn)基因小鼠是由含GFP基因的受精卵發(fā)育而成，所以該轉(zhuǎn)基因小鼠的全身各種組織或細(xì)胞均含有GFP基因，但由該基因控制合成的GFPmRNA和GFP蛋白卻只在小鼠的頭部特定細(xì)胞內(nèi)才表達(dá)含有。