Question

【題目】（8分）2012年諾貝爾醫(yī)學(xué)和生理學(xué)獎授予英國科學(xué)家約翰·戈登和日本科學(xué)家山中伸彌。約翰·戈登在20世紀(jì)60年代做過一個劃時代的實驗：把美洲爪蟾的小腸上皮細胞核注入去核的卵細胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)一部分卵依然可以發(fā)育成蝌蚪，其中的一部分蝌蚪可以繼續(xù)發(fā)育成為成熟的爪蟾。山中伸彌等科學(xué)家將四個關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)入小鼠的成纖維細胞，使其變成多功能干細胞（iPS），這些干細胞可再轉(zhuǎn)化成老鼠體內(nèi)任何種類的細胞�；卮鹣铝袉栴}：

（1）約翰·戈登之后，科學(xué)界利用該技術(shù)進行更多細胞核轉(zhuǎn)移實驗，復(fù)制出多種哺乳類動物。在哺乳動物的核轉(zhuǎn)移實驗中，一般通過 （物理方法）將受體細胞激活，使其進行細胞分裂和發(fā)育，當(dāng)胚胎發(fā)育到 階段時，將胚胎移入受體（代孕）動物體內(nèi)。

（2）從卵巢中吸取的卵母細胞，一般要培養(yǎng)到 階段才能用于實驗。

（3）利用體細胞進行核移植技術(shù)的難度明顯高于胚胎細胞核移植的原因是 。

（4）在山中伸彌的實驗中，利用了逆轉(zhuǎn)錄病毒，該病毒的作用是 。

（5）一般情況下，體外擴增目的基因常用的方法是 。在動物細胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增值，這種現(xiàn)象稱為細胞的 。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用 處理。

Answer 1

【答案】（1）電脈沖（或電刺激） 桑葚胚或囊胚 （2）MⅡ中期（減數(shù)分裂第二次分裂中期） （3）體細胞核比胚胎細胞核分化程度高，不容易恢復(fù)全能性。（4）目的基因的載體

（5）PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） 接觸抑制 胰蛋白

【解析】試題分析：（1）在哺乳動物的核轉(zhuǎn)移實驗中，一般通過電脈沖（或電刺激）將受體細胞激活。胚胎發(fā)育到桑葚胚或囊胚移入受體（代孕）動物體內(nèi)。（2）從卵巢中吸取的卵母細胞，一般要培養(yǎng)到MⅡ中期（減數(shù)分裂第二次分裂中期）才能用于實驗。3）利用體細胞進行核移植技術(shù)的難度明顯高于胚胎細胞核移植的原因是體細胞核比胚胎細胞核分化程度高，不容易恢復(fù)全能性。（4）逆轉(zhuǎn)錄病毒作為目的基因的載體。（5）一般情況下，體外擴增目的基因常用的方法是PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）。貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增值，為接觸抑制 。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用胰蛋白酶分解細胞間質(zhì)。