Question

11．請(qǐng)回答下列有關(guān)微生物的一些問題．
（1）微生物的分布：微生物主要分布在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層；不同微生物對(duì)pH的要求不同，細(xì)菌常生活在酸堿度接近中性的潮濕土壤中．
（2）微生物的消毒和滅菌：在菊花組織培養(yǎng)中，對(duì)外植體常用酒精和氯化汞進(jìn)行消毒．在微生物培養(yǎng)中，對(duì)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌方法進(jìn)行滅菌．如果要檢測(cè)滅菌是否徹底，可以采用的方法是將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生．
（3）微生物的應(yīng)用：在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，運(yùn)用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精，請(qǐng)寫出該過程的化學(xué)反應(yīng)式C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2C₂H₅OH+2CO₂+能量．
在果醋制作時(shí)，運(yùn)用醋酸菌在有氧和糖源充足時(shí)，將糖分解成醋酸．
（4）微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（5）微生物的鑒定：為檢測(cè)尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的選擇（選擇、鑒別）培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變紅色．
（6）在酸性條件下，可用重鉻酸鉀來檢測(cè)發(fā)酵產(chǎn)物中是否有酒精產(chǎn)生．若想進(jìn)一步檢測(cè)所得果酒中酵母菌的密度，可采用稀釋涂布平板法．
（7）果汁為酵母菌的生長(zhǎng)和繁殖提供的營(yíng)養(yǎng)成分是碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子．
（8）發(fā)酵完成后，生物興趣小組同學(xué)制作的果酒品質(zhì)非常好．為了方便后續(xù)年級(jí)使用，可將菌液甘油管藏法保存．

Answer 1

分析 微生物的分離是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要環(huán)節(jié)．土壤中的微生物很多，本題中要從土壤中獲得分解纖維素的菌．接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法：由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落．
用途：一般多用于從菌種的純化；稀釋平板計(jì)數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落，即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞．計(jì)數(shù)時(shí)，首先將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個(gè)細(xì)胞存在（否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．
用途：一般多用于篩選菌株．一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計(jì)數(shù)．剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）微生物主要分布在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層；不同微生物對(duì)pH的要求不同，細(xì)菌常生活在酸堿度接近中性的潮濕土壤中．
（2）在菊花組織培養(yǎng)中，對(duì)外植體常用酒精和氯化汞進(jìn)行消毒．在微生物培養(yǎng)中，對(duì)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌方法進(jìn)行滅菌．要檢測(cè)滅菌是否徹底，可以采用的方法是將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生．
（3）酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精的反應(yīng)式為C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2C₂H₅OH+2CO₂+能量，在果醋制作時(shí)，利用醋酸菌在有氧和糖源充足時(shí)，將糖分解成醋酸．
（4）常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（5）檢測(cè)尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，觀察是否變紅．如果存在尿素分解菌，則指示劑將變紅色．
（6）檢測(cè)發(fā)酵產(chǎn)物中是否有酒精產(chǎn)生抗原酸性的重鉻酸鉀來檢測(cè)呈灰綠色．進(jìn)一步檢測(cè)所得果酒中酵母菌的密度，可采用稀釋涂布平板法．
（7）果汁為酵母菌的生長(zhǎng)和繁殖提供的營(yíng)養(yǎng)成分是碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子．
（8）菌液與甘油充分混勻后放在-20℃的冷冰箱中，即用甘油管藏的方法長(zhǎng)期保存．
故答案為：
（1）接近中性
（2）氯化汞　高壓蒸汽滅菌　將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生
（3）C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2C₂H₅OH+2CO₂+能量　有氧
（4）平板劃線法　稀釋涂布平板法
（5）選擇　酚紅　紅
（6）重鉻酸鉀     稀釋涂布平板
（7）碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子
（8）甘油管藏法

點(diǎn)評(píng) 微生物這部分內(nèi)容是高考試題的一個(gè)熱點(diǎn)一般體現(xiàn)在對(duì)能源的利用，考察的知識(shí)點(diǎn)有微生物的無(wú)菌操作、微生物的分離以及產(chǎn)品的提取，注意總結(jié)．