Question

【題目】凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶。研究人員運(yùn)用基因工程技術(shù)，將編碼該酶的基因轉(zhuǎn)移到了微生物細(xì)胞中并使之表達(dá)。下圖是基因工程中獲得的基因和構(gòu)建重組質(zhì)粒過程，請(qǐng)回答有關(guān)問題：

（1）分析上圖可知，構(gòu)建重組質(zhì)粒（如圖所示）最好選用 限制酶，理由是 。

（2）工業(yè)生產(chǎn)過程中，最初多采用重組大腸桿菌或芽孢桿菌生產(chǎn)凝乳酶，將目的基因?qū)�入大腸桿菌或芽孢桿菌前所做的處理方法是 �，F(xiàn)在生產(chǎn)凝乳酶多采用重組毛霉或重組酵母菌，毛霉或酵母菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)是 。

（3）研究發(fā)現(xiàn)，如果將該凝乳酶20位和24位氨基酸改變?yōu)榘腚装彼幔�其催化能力將提�?倍�？茖W(xué)家可以生產(chǎn)上述高效凝乳酶的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是 ，該生物工程技術(shù)的實(shí)質(zhì)是 。

（4）轉(zhuǎn)基因技術(shù)和細(xì)胞工程在動(dòng)植物中都有廣泛應(yīng)用，但是胚胎工程只是指對(duì)動(dòng)物的 所進(jìn)行的多種亞顯微操作和處理技術(shù)。

Answer 1

【答案】（1）BamHI和PstI 提高重組DNA的比例（防止自身的黏性末端連接或防止目的基因與載體反向連接）

（2）用鈣離子處理細(xì)胞，使之轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞

含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工和修飾

（3）蛋白質(zhì)工程 基因工程的延伸（或在基因工程基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程）

（4）配子或早期胚胎

【解析】

試題分析：（1）限制酶不能破壞目的基因，也不能破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因，且應(yīng)該用不同的限制酶進(jìn)行切割，以防止自身的黏性末端連接或防止目的基因與載體反向連接，所以構(gòu)建圖示的重組質(zhì)粒應(yīng)該選擇BamHI和PstI。

（2）基因工程中，將目的基因?qū)�入大腸桿菌等微生物細(xì)胞時(shí)，需要用氯化鈣處理大腸桿菌，使之轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞，便于目的基因的導(dǎo)入。毛霉或酵母菌含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工和修飾，所以生產(chǎn)凝乳酶多采用毛霉或酵母菌作為受體細(xì)胞。

（3）根據(jù)題意分析，通過改造凝乳酶的氨基酸，提高了其催化功能，利用的是蛋白質(zhì)工程，該過程的實(shí)質(zhì)是基因工程的延伸，又稱為第二代基因工程。

（4）胚胎工程只是指對(duì)動(dòng)物的配子或早期胚胎所進(jìn)行的多種亞顯微操作和處理技術(shù)。