Question

10．臨床使用抗生素前，有時需要做細(xì)菌耐藥實驗．實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性．回答下列問題：
（1）為統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，常將樣品用稀釋涂布法接種于培養(yǎng)基表面．運用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，原因是當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板山觀察到的只是一個菌落．
（2）為了檢驗該致病菌對于抗生素的敏感性，在該病菌菌落均勻生長的平板的不同位置，分別放置含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片，培養(yǎng)一段時間后，在四個濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，由此推斷，該病人目前適合使用的抗生素A．含C的濾紙片周圍透明圈，最可能的原因是該致病菌對C的敏感性比對A的弱導(dǎo)致的結(jié)果；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)一個菌落，這種菌落的出現(xiàn)可能是由于接種過程不嚴(yán)格導(dǎo)致的，也可能是產(chǎn)生了抗生素D的耐藥菌，這種變異的特點是隨機(jī)的、不定向的（至少列舉兩個）．
（3）實驗中培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌、接種環(huán)用灼燒滅菌、接種過程也在酒精燈火焰旁進(jìn)行，其達(dá)到的目的是確定某致病菌對不同抗生素的敏感性．

Answer 1

分析 （1）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．
（2）根據(jù)材料分析，透明圈的出現(xiàn)，說明該菌不能生長．
（3）常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌．

解答 解：（1）為統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，常將樣品用稀釋涂布平板法接種于培養(yǎng)基表面．當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板山觀察到的只是一個菌落，因此運用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低．
（2）在抗藥性檢驗過程中，如果在菌落周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細(xì)菌；透明圈的大小表示著此種抗生素抗菌的強(qiáng)弱，由于四個濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，可以推斷出抗生素A對該致病菌的效果最好，含C的濾紙片周圍透明圈比含A的小，說明該致病菌對C的敏感性較A的弱；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)一個菌落，這種菌落的出現(xiàn)可能是由于接種過程不嚴(yán)格導(dǎo)致的，也可能是產(chǎn)生了抗生素D的耐藥菌，這種變異屬于基因突變，基因突變具有隨機(jī)性、不定向性等特點．
（3）實驗中培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌、接種環(huán)用灼燒滅菌、接種過程也在酒精燈火焰旁進(jìn)行，其達(dá)到的目的是確定某致病菌對不同抗生素的敏感性．
故答案為：
（1）稀釋涂布     當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板山觀察到的只是一個菌落
（2）A     該致病菌對C的敏感性比對A的弱      隨機(jī)的    不定向的
（3）高壓蒸汽      確定某致病菌對不同抗生素的敏感性

點評 本題主要考查微生物的篩選與分離，培養(yǎng)基的制作過程等知識，意在提高學(xué)生對相關(guān)知識點的識記與理解．