Question

【題目】下圖為利用人成纖維細(xì)胞(具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活)和小鼠骨髓瘤細(xì)胞(具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活)進(jìn)行人類基因定位的操作示意圖，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：

(1)圖示方法是____________技術(shù)的應(yīng)用，該技術(shù)的基礎(chǔ)是__________技術(shù)。

(2)操作所用的成纖維細(xì)胞應(yīng)傳代_____代以內(nèi)，誘導(dǎo)融合時(shí)需要加入的化學(xué)促融劑是______。

(3)人、鼠細(xì)胞先經(jīng)過(guò)細(xì)胞膜融合形成______細(xì)胞，再經(jīng)過(guò)一次________，形成單核細(xì)胞。

(4)HAT培養(yǎng)基起_______培養(yǎng)作用，培養(yǎng)時(shí)溫度應(yīng)為_____°C，操作中加入烏本苷的目的是_________。

(5)下表所示為雜交細(xì)胞A、B、C中存在的人類染色體及人類特有的4種酶（“十”表示存在，“一”表示不存在），這4種酶均為單基因編碼產(chǎn)生，據(jù)表判斷，編碼_______酶的基因位于染色體2上。

Answer 1

【答案】 )動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 10 PEG 多核 有絲分裂 選擇 36.5±0.5 除去成纖維細(xì)胞 m和p

【解析】試題分析：分析題圖，圖示為利用人成纖維細(xì)胞（具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活）和小鼠骨髓瘤細(xì)胞（具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活）進(jìn)行人類基因定位的操作示意圖，成纖維細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞在促融劑的作用下形成三種雜交細(xì)胞，即成纖維細(xì)胞自身融合細(xì)胞、小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和雜交細(xì)胞；在HAT培養(yǎng)基上篩選出成纖維細(xì)胞自身融合細(xì)胞和雜交細(xì)胞；加人鳥本苷的目的是除去成纖維細(xì)胞，留下雜交細(xì)胞。

（1）由圖分析，該過(guò)程為動(dòng)物細(xì)胞融合，其基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。

（2）目前使用的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)的，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞可以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。誘導(dǎo)兩個(gè)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法：物理（離心、振動(dòng)、電刺激）、化學(xué)（PEG）、生物誘導(dǎo)（滅活的病毒）。

（3）人、鼠細(xì)胞先經(jīng)過(guò)細(xì)胞膜融合形成多核細(xì)胞，經(jīng)過(guò)一次有絲分裂，形成單核細(xì)胞。

（4）據(jù)題干信息，人成纖維細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基上存活，而小鼠骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上存活，則HAT培養(yǎng)基起選擇培養(yǎng)作用，篩選出人成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜溫度為36.5±0.5℃；由圖可知，操作中加人鳥本苷的目的是除去成纖維細(xì)胞，篩選出雜交細(xì)胞。

（5）據(jù)表判斷，雜交細(xì)胞A中存在2和3號(hào)染色體，表達(dá)出酶m和p；雜交細(xì)胞B存在1和2號(hào)染色體，表達(dá)出酶n和q；說(shuō)明編碼m和p酶的基因位于染色體2上。