Question

15．尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為氨后才能被植物吸收利用．分解尿索的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目，培養(yǎng)基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4 g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根據培養(yǎng)基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌？不能（能/不能），原因是培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物
（2）要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數目就能大約推測出樣品中活菌數．
（3）初步分離脲酶通常用凝膠色譜法法，如圖，試管中收集到的液體最先出現的是相對分子量較大的蛋白質鑒定分離出的脲酶純化程度，一般采用電泳法．
（4）該同學設想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素”，尿素肥效一定更高．為了提高“加酶尿素”中脲酶的利用率，應當采用固定化酶技術．

Answer 1

分析 尿素分解菌體內的脲酶能夠將土壤中的尿素分解為氨才能被植物吸收利用，尿素分解菌屬于細菌，篩選尿素分解菌需要使用以尿素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．微生物篩選與培養(yǎng)的關鍵是無菌操作，常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解答 解：（1）據題表分析，表中的配方不能篩選分離出尿素分解菌，原因是沒有使用選擇培養(yǎng)基，即培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物．
（2）稀釋涂布平板法接種常用來進行微生物的計數，統(tǒng)計平板上的菌落數目可以推測出樣品中活菌數．
（3）脲酶的化學本質是蛋白質，可以用凝膠色譜法進行初步分離．凝膠色譜柱中大分子的蛋白質先流出，對分離出的脲酶可以用電泳法純化．
（4）利用固定化酶技術，可以使脲酶反復使用，提高了酶的利用率．
故答案為：
（1）不能  培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物
（2）稀釋涂布平板  菌落數目
（3）凝膠色譜法     相對分子量較大的蛋白質   電泳
（4）固定化酶

點評 本題主要考查目的微生物的篩選與分離，意在強化學生對微生物篩選過程與分離的理解與運用．