Question

某同學(xué)想研究氨基酸的分離和鑒定的方法。已知實(shí)驗(yàn)室中有0．5%的賴(lài)氨酸,脯氨酸,纈氨酸,苯丙氨酸,亮氨酸溶液以及它們的混合液(各組份濃度均為0．5%)。

現(xiàn)提供如下器材和試劑：

A．器材

 1．層析缸 2．毛細(xì)管 3．噴霧器 4．層析濾紙 5．其他相關(guān)器材(如剪刀,鉛筆,U形扣等)

B．試劑

1．?dāng)U展劑:4份水飽和的正丁醇和1份醋酸的混合物

2．顯色劑:0．1%水和茚三酮溶液

若該同學(xué)想證明混合液確實(shí)含有上述5種氨基酸，請(qǐng)利用題給條件設(shè)計(jì)試驗(yàn)：

1)實(shí)驗(yàn)原理：

A．除脯氨酸,羥脯氨酸和茚三酮反應(yīng)產(chǎn)生黃色物質(zhì)外,所用a－氨基酸和一切蛋白質(zhì)都能和茚三酮反應(yīng)生成藍(lán)紫色物質(zhì)。

B．在一定條件下,                                                             

                                                                。

2)實(shí)驗(yàn)步驟：

①取層析濾紙一張,剪成20厘米長(zhǎng),14厘米寬的濾紙條,在紙的一端距邊緣2-3厘米處用鉛筆畫(huà)一條直線,再此直線上每間隔2厘米作一記號(hào),共需作       處記號(hào)．

②                                                                          

                                                    。

③將處理好的濾紙條卷成筒狀用U形扣固定,放入加好了擴(kuò)展劑的層析缸中，待擴(kuò)展劑上升到一定階段時(shí)取出濾紙,自然風(fēng)干。本步驟的注意事項(xiàng)是:                      

                                                      。

④                                                                           

                                                              ．

3)請(qǐng)?jiān)谙聢D中繪出濾紙條上的預(yù)期結(jié)果：(已知擴(kuò)散速度為賴(lài)氨酸<脯氨酸<纈氨酸<苯丙氨酸<亮氨酸)

Answer 1

         1) 實(shí)驗(yàn)原理：不同氨基酸在擴(kuò)展劑的溶解度不同,所以在濾紙上的擴(kuò)散速度不同,從而出現(xiàn)在濾紙的不同位置上。

2)實(shí)驗(yàn)步驟：

①  6 

② 用毛細(xì)管吸取氨基酸樣品點(diǎn)在標(biāo)記上 ,干燥后重復(fù)2-3次 。

③ 點(diǎn)樣的一端在下,擴(kuò)展劑的液面要低于點(diǎn)樣線

④用噴霧器向?yàn)V紙上均勻噴上0.1%的茚三酮溶液,待干燥后,觀察并記錄層析斑點(diǎn)的位置.

3)略