Question

λ噬菌體有極強(qiáng)的侵染能力，能在細(xì)菌中快速進(jìn)行DNA復(fù)制，產(chǎn)生子代噬菌體，最終導(dǎo)致細(xì)菌破裂（稱為溶菌狀態(tài)）；或者整合到細(xì)菌基因組中潛伏起來，不產(chǎn)生子代噬菌體（稱為溶原狀態(tài)）。在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中常用λ噬菌體構(gòu)建基因克隆載體，使其在受體細(xì)菌中大量擴(kuò)增外源DNA，以備研究使用。相關(guān)操作如下圖所示，請回答：

（1）在構(gòu)建基因克隆載體時(shí)，可被噬菌體蛋白質(zhì)包裝的DNA長度約為36～51kb，則經(jīng)人工改造的λgtl0載體可插入的外源DNA的最大長度為______kb。為獲得較大的插入能力，可刪除λ噬菌體DNA組成中的______序列以縮短其長度。

（2）構(gòu)建基因克隆載體時(shí)，需用到的酶是______。λ噬菌體DNA上通常沒有適合的標(biāo)記基因，因此人工改造時(shí)需加裝適合的標(biāo)記基因，如下圖λgtl0載體中的imm434基因，該基因編碼一種阻止λ噬菌體進(jìn)入溶菌狀態(tài)的阻遏物。外源DNA的插入位置應(yīng)位于imm434基因______（之中/之外），使經(jīng)侵染培養(yǎng)后的受體菌處于______狀態(tài)，表明已成功導(dǎo)入目的基因。

（3）合成噬菌體所需的小分子原料主要是_____________。分離純化噬菌體重組DNA時(shí)，將經(jīng)培養(yǎng)10小時(shí)左右的大腸桿菌=噬菌體的培養(yǎng)液超速離心，從______________（上清液、沉淀物）獲得噬菌體。

Answer 1