Question

（11分）利用紫外線誘變選育高產(chǎn)β-胡蘿卜素的三孢布拉霉負菌（單細胞真菌），未突變菌不能在含有濃度為10-5M的β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長。菌體隨β━胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色。圖甲為選育及提取獲得β-胡蘿卜素流程。

（1）三孢布拉霉負菌與細菌共同具有的細胞器是________。從真菌細胞中提取酶時，常常采用_______ 法將相對分子質量不同的酶進行分離。

（2）培養(yǎng)基中的葡萄糖為菌體生長提供_________________；為選出高產(chǎn)突變菌種，還應在培養(yǎng)基中添加_____________ 。

（3）進行③過程時，應選取________色的菌落接種至液體培養(yǎng)基。為篩選純化β-胡蘿卜素產(chǎn)量高的菌種，采取重復________（填圖甲中數(shù)字）過程。

（4）固體平板培養(yǎng)基經(jīng)過程②接種培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學的接種方法是____________；只有少數(shù)菌能生長形成菌落的根本原因是_____________________ 。

（5）過程⑥是______________，用紙層析法鑒定提取的胡蘿卜素粗品，結果發(fā)現(xiàn)顏色較淺，導致該現(xiàn)象的原因可能是萃取時，萃取劑使用量_________，提取的色素少。

（6）選取胡蘿卜韌皮部細胞進行植物組織培養(yǎng)時，其操作步驟是①制備MS培養(yǎng)基；②_ ；③接種；④培養(yǎng)；⑤移栽；⑥栽培。

Answer 1

(11分，每空1分)

（1） 核糖體 凝膠色譜

（2） 碳源（答碳源和能源也給分） 10 -5M的β━紫羅酮（答全給分）

（3） 橙紅 ③④

（4） 稀釋涂布平板法 基因突變頻率低和不定向性（答1點也給分）

（5） 濃縮 過少

（6）外植體消毒

【解析】

試題分析：（1）三孢布拉霉負菌為單細胞真菌，由真核細胞構成，細菌為原核生物，由原核細胞構成，原核細胞與真核細胞共同具有的細胞器是核糖體。從真菌細胞中提取的酶的化學本質是蛋白質，將相對分子質量不同的蛋白質進行分離時，常常采用凝膠色譜法。

（2）培養(yǎng)基中的葡萄糖為菌體生長提供碳源。依題意，未突變菌不能在含有濃度為10-5M的β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長，因此為選出高產(chǎn)突變菌種，還應在培養(yǎng)基中添加10 -5M的β━紫羅酮。

（3）因菌體隨β━胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色，為選育高產(chǎn)β-胡蘿卜素的三孢布拉霉負菌，進行③過程時，應選取橙紅色的菌落接種至液體培養(yǎng)基，并且采取重復③④的過程。

（4）結合圖甲和圖乙可知，平板培養(yǎng)后，形成了多個菌落，因此為稀釋涂布平板法。只有少數(shù)菌能生長形成菌落的根本原因是基因突變的頻率低，具有不定向性。

（5）提取胡羅卜素的流程是：……萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素，因此過程⑥是濃縮。在萃取這一環(huán)節(jié)，若萃取劑使用量過少，溶解在萃取液中的β━胡蘿卜素的量就會減少，即提取的色素少，就會導致用紙層析法鑒定提取的胡蘿卜素粗品時，呈現(xiàn)的顏色較淺。

（6）植物組織培養(yǎng)的實驗操作流程是：①制備MS培養(yǎng)基→②外植體消毒→③接種→④培養(yǎng)→⑤移栽→⑥栽培。

考點：本題考查微生物的培養(yǎng)與應用、胡羅卜素的提取、植物的組織培養(yǎng)技術、原核細胞與真核細胞的統(tǒng)一性、基因突變的相關知識，意在考查學生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系，能從題圖中提取有效信息并運用所學知識與觀點，對實驗現(xiàn)象和結果進行解釋、分析和處理，做出合理的判斷或得出正確結論的能力。