Question

【生物技術實踐】(15分)

某實驗小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，設計實驗步驟如下，請給予合理的補充。

(1)采樣與培養(yǎng)：將采集的土樣混勻后稱取1 g，置于經過滅菌處理的________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基中，28℃振蕩培養(yǎng)。

(2)接種與選擇：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進行________處理。之后，將菌液涂布接種于以________ 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30℃條件下培養(yǎng)。為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈________狀態(tài)放置。此外，為排除其他因素的影響，提高實驗可信度，本步驟需設計________作為空白對照。

(3)篩選與純化：將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍，如果菌落周圍的現(xiàn)象是________，則說明此種菌能夠____________________。從平板中挑取實驗效果明顯的目的菌株，采用________法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對菌株進行進一步的純化。

 

Answer 1

【答案】

(1)液體  (2)系列稀釋(或“梯度稀釋”)　淀粉　倒置　未接種的空白培養(yǎng)基(或“接種等量無菌水的培養(yǎng)基”)  (3)出現(xiàn)透明圈　分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解　平板劃線

【解析】

試題分析：（1）土壤中微生物的采集，需用液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

（2）為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進行系列稀釋處理。然后將菌液涂布在以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基上，然后進行倒置平板，置于適宜的條件下進行培養(yǎng)。為排除其他因素的影響，提高實驗可信度，需設計未接種的空白培養(yǎng)基(或“接種等量無菌水的培養(yǎng)基”) 作為空白對照。

（3）篩選所需要的微生物，可將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍，如果菌落周圍出現(xiàn)透明圈，表明此種菌能夠分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解。若進行純化培養(yǎng)，可進行平板劃線法�！�

考點：本題考查微生物培養(yǎng)的相關知識，意在考查考生理解和掌握微生物培養(yǎng)知識的要點，能夠正確進行生物實驗能力。