Question

家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力．將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥．
①進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用

 

酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞．
②為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的

 

和

 

之間．
③采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞．PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、

 

和

 

；在PCR反應(yīng)過(guò)程中，有一個(gè)環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對(duì)較低的55℃左右，其作用是

 

．
④利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以

 

增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、基因工程是指按照人類的愿望，將不同生物的遺傳物質(zhì)在體外人工剪切并和載體重組后轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)增，并表達(dá)產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的技術(shù)．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)．
2、PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫．PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)．通過(guò)這一技術(shù)，可以獲取大量的目的基因．PCR擴(kuò)增反應(yīng)需要兩種引物、模板DNA、原料（4種脫氧核苷酸）、酶（耐高溫的DNA聚合酶）．

解答： 解：①進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞．
②為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間．
③PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和（對(duì)干擾素基因特異性的）DNA引物；在PCR反應(yīng)過(guò)程中，有一個(gè)環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對(duì)較低的55℃左右，其作用是引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上．
④利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換．
故答案為：
①胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）
②啟動(dòng)子                  終止子
③TaqDNA聚合酶      （對(duì)干擾素基因特異性的）DNA引物     引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上  
④增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷能力．基因工程是考查的重點(diǎn)知識(shí)，與細(xì)胞工程、胚胎工程等現(xiàn)代生物技術(shù)都有一定聯(lián)系．復(fù)習(xí)時(shí)可以建立知識(shí)框架，幫助記憶和理解．