【題目】【廣東省中山市2017屆高三5月模擬生物試題】【生物-選修1:生物技術(shù)實(shí)踐】毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一種有機(jī)磷殺蟲劑,長期使用將導(dǎo)致土壤中農(nóng)藥殘留嚴(yán)重。某研究小組從長期施藥的韭菜溫室土壤(偏酸性)里分離出能降解毒死蜱的木霉,并對其降解特性進(jìn)行初步研究。請回答:

(1)用于分離木霉菌種的培養(yǎng)基屬于__________________培養(yǎng)基。配制此培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)加入____________作為唯一碳源。接種前,將培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r(shí)間,觀察培養(yǎng)基__________________,以確定培養(yǎng)基是否被污染。

(2)純化木霉時(shí),統(tǒng)計(jì)出0.2 mL的稀釋液在稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為40個(gè),則每mL樣液中的菌落數(shù)為__________個(gè)。用此法測定木霉數(shù)量,實(shí)際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)量______,原因是________________________________________________。

(3)探究pH對木霉降解毒死蜱活性的影響

①研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100 mg/L 毒死蜱,5天后檢測毒死蜱的殘留量(圖1)。由圖可推知:在偏酸性的土壤中,__________________________。

②研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100 mg/L 毒死蜱,再分別接種1 mL木霉懸液,混合均勻,5天后檢測毒死蜱的殘留量(圖2)。在此韭菜溫室土壤中,若要提高木霉對毒死蜱的降解活性,可對土壤作何處理?_____________________________。

【答案】 (1) 選擇 毒死蜱 是否產(chǎn)生菌落 (2) 2×107 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 (3) 毒死蜱穩(wěn)定性較好 適當(dāng)提高土壤的pH至7左右

【解析】(1)要分離出能降解毒死蜱的木霉,需要以毒死蜱作為唯一碳源培養(yǎng)基,在該培養(yǎng)基上只有能降解毒死蜱的木霉能生存,其它微生物都不能生存因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。接種前,將培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r(shí)間觀察培養(yǎng)基是否產(chǎn)生菌落,以確定培養(yǎng)基是否被污染。

(2)純化木霉時(shí),統(tǒng)計(jì)出0.2mL的稀釋液在稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為40個(gè),則每mL樣液中的菌落數(shù)為40×1/0.2×105=2×107個(gè)用此法測定木霉數(shù)量,因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,因此實(shí)際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)量多。

(3)①由圖1可推知在偏酸性的土壤中,毒死蜱穩(wěn)定性較好。

由圖2可知在此韭菜溫室土壤中,若要提高木霉對毒死蜱的降解活性可適當(dāng)提高土壤的pH至7左右。

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(2)過程提取的DNA需要用限制酶,該酶能夠識別__________,并且使_________斷開。

(3)為在短時(shí)間內(nèi)大量獲得目的基因,可用PCR方法擴(kuò)增,該反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA、_______________________。

(4)蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程,其基本途徑是從__________出發(fā),通過設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和推測相應(yīng)的氨基酸序列,進(jìn)而確定相對應(yīng)的__________,據(jù)此獲得基因,再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì)。

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