為研究人參細胞的能量代謝的特點,某高中學校生物研究性學習小組的同學利用熒光素一熒光素酶生物發(fā)光法,測定人參的愈傷組織中ATP的含量.
實驗原理:熒光素在熒光素酶、ATP等物質(zhì)的參與下,進行反應,發(fā)出熒光;用分光光度計可測定發(fā)光強度;當熒光素和熒光素酶都足量時,在一定范圍內(nèi),ATP的含量與發(fā)光強度成正比.
實驗步驟:
IATP的提取:稱取一定量的人參的愈傷組織,研磨后沸水浴10min,冷卻至室溫,離心,取上清液.
IIATP的測定:吸取一定量的上清液,放人分光光度計的反應室內(nèi),并注人適量的所需物質(zhì),在有氧等適宜條件下進行反應,記錄發(fā)光強度并計算ATP含量.
請回答下列問題.
(1)步驟Ⅰ中的沸水浴處理,使酶的
被破壞而失活.
(2)步驟B注人的物質(zhì)中,屬于反應物的是
;分光光度計的反應室內(nèi),能量形式的轉(zhuǎn)換方式是
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(3)學習小組的同學探究“測定ATP時所需熒光素酶溶液的最佳濃度”的實驗,結(jié)果如圖.
①學習小組配制了1×10
-1mol/L的ATP的標準液和70mg/L熒光素酶溶液(過量)以及
溶液進行實驗.
②結(jié)果表明:圖中
點所對應的熒光素酶濃度為最佳濃度.e、f、g點所對應的熒光素酶濃度不同,但發(fā)光強度相同,這是因為
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(4)ATP測定對食品衛(wèi)生監(jiān)控有重要意義.食品衛(wèi)生檢驗人員利用上述生物發(fā)光法測定某熟食品樣品中病菌的ATP總含量,可測算出病菌的數(shù)量,從而判斷食品被污染的程度.做出上述判斷的理由是:每個病菌細胞中ATP的含量
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