下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)。
下圖是轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程,含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1) 用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用SmaI酶切割,原因是__________________________________________。
(2) 構(gòu)建含目的基因的重組質(zhì)粒A時(shí),選 用 BamhHI 和HindⅢ酶對(duì)_______和 _______進(jìn)行切割,可以防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化。
(3) ①??⑤中存在堿基互補(bǔ)配對(duì)的是____________。
(4) 香蕉組織細(xì)胞具有__________,因此,可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入目的(抗病)基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中④、⑤依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中香蕉組織細(xì)胞的_________、____________。培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還需要添加_________和__________以誘導(dǎo)外植體完成④、⑤生理過(guò)程,培養(yǎng)成完整的植物體。在形成愈傷組織的過(guò)程中,細(xì)胞的新陳代謝類(lèi)型是_____________。
(5) 如何檢測(cè)圖示過(guò)程最終是否取得成功?____________________________。
(1)SmaI酶會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因(2分) (2)外源DNA和質(zhì)粒(2分) (3)①④⑤ (2分) (4)全能性 脫分化 再分化 生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素 異養(yǎng)需氧型(2分) (5)用蟲(chóng)子感染轉(zhuǎn)基因香蕉,觀察是否抗蟲(chóng)(2分)
|