Question

【題目】下圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡化流程。請分析回答：

（1）過程①使用的 酶能使特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的 （化學(xué)鍵）斷開。運載體的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過 __而結(jié)合。過程②需要用到 酶。

（2）A上應(yīng)有RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動干擾素基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為 。為直接檢測干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄，可從細(xì)胞中提取 __與用放射性同位素標(biāo)記的____________作探針進(jìn)行分子雜交，。

（3）利用PCR擴(kuò)增儀大量擴(kuò)增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根據(jù)這一序列合成 ，除了該物質(zhì)和目的基因外，擴(kuò)增儀中還需加入四種脫氧核苷酸和 酶，并適時調(diào)整溫度，才能使目的基因數(shù)量成指數(shù)式增長。

（4）在該工程中所用的基因“剪刀”能識別的序列和切點是—G′GATCC—。

請畫出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過程圖

Answer 1

【答案】（1）（同一種）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）； 磷酸二酯鍵； 堿基互補原則 ； DNA連接酶．

（2）啟動子 mRNA 目的基因

（3）引物 熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）

（4）—G′GATCC— —G GATCC— —C CTAGG— —CCTAG G—

【解析】

試題分析：（1）過程（1）是獲取目的基因，需用限制性核酸內(nèi)切酶把特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵分開，然后運載體的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端通過堿基互補配對原則連接，DNA連接酶連接磷酸二酯鍵。

（2）啟動子的作用是：RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。檢測干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄用分子雜交，即用放射性同位素標(biāo)記的目的基因與從細(xì)胞中提取的mRNA雜交。

（3）PCR技術(shù)的條件是：一段是已知的核苷酸序列即引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶、四種脫氧核苷酸、目的基因。

（4）基因“剪刀”會切出兩個粘性末端，而且互補。