Question

【題目】受損傷的馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)酚氧化酶（PPO）和底物（酚類(lèi)物質(zhì)）直接接觸，引起馬鈴薯的褐變，為探究溫度對(duì)PPO活性的影響，實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：

（1）PPO粗提液的提取

低溫下將新鮮馬鈴薯用蒸餾水洗凈、去皮，取20g樣品放入含50mL磷酸緩沖液（PH值為5．5）的研缽中，同時(shí)加入少量石英砂，研磨、離心、上清液即為PPO的粗提液，加緩沖液研磨的目的是

（2）不同溫度下PPO活性的測(cè)定

步驟順序	試管1	試管2	試管3	試管4	試管5	試管6	試管7	試管8
PPO粗提液	2mL		2mL		2mL		2mL
酚類(lèi)底物		2mL		2mL		2mL		2mL
反應(yīng)	混合振蕩		混合振蕩		混合振蕩		混合振蕩
溫度預(yù)處理	（5min）0℃		15℃		30℃		45℃
保溫時(shí)間	5min		5min		5min		5min
記錄結(jié)果	+		++++		++++		++

（注：反應(yīng)底物充足；實(shí)驗(yàn)結(jié)果中“+”越多褐色越深）

①實(shí)驗(yàn)步驟順序有不妥之處，請(qǐng)改正 。

②實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性，從酶的特性分析其原因是 。

③為進(jìn)一步探究PPO最適溫度，應(yīng)在 范圍內(nèi)設(shè)置溫度梯度。

（3）I．在溫度30℃的條件下，取等量提取液分別加到四支盛有等量過(guò)氧化氫溶液、pH分別為3、5、7、9的試管中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)每一支試管都產(chǎn)生氣體。請(qǐng)回答：

①該實(shí)驗(yàn)的課題是： 。

②各實(shí)驗(yàn)組均在30℃下進(jìn)行的原因是：a ；b 。

Ⅱ．將加入4支試管中的馬鈴薯提取液的量減半，重復(fù)實(shí)驗(yàn)I。分別測(cè)定實(shí)驗(yàn)I、Ⅱ中過(guò)氧化氫在相同時(shí)間內(nèi)的含量變化，繪制成如圖所示曲線，請(qǐng)回答：曲線A是實(shí)驗(yàn) （選填I(lǐng)或Ⅱ）的結(jié)果。

Answer 1

【答案】（14分，除特殊注明外，每空2分）

（1）保持PPO的活性（防止PPO失活）

（2）①“反應(yīng)”步驟改在“溫度預(yù)處理”之后

②在酶的最適溫度前后，可以有相同的催化效率（合理給分）

③15℃30℃

（3）Ⅰ．①探究不同PH對(duì)過(guò)氧化氫酶活性的影響

②30℃是過(guò)氧化氫酶作用的適宜溫度（1分）排除溫度變化（無(wú)關(guān)變量）對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 （1分）

Ⅱ．Ⅱ

【解析】（1）過(guò)酸、過(guò)堿都會(huì)使酶的空間結(jié)構(gòu)被破壞，使酶失活，研磨時(shí)加緩沖液研磨的目的是防止酚氧化酶（PPO）失活。

（2）①本實(shí)驗(yàn)應(yīng)該將酶和底物先放在不同的溫度條件下一段時(shí)間，再將相同溫度下的酶和底物混合，故“反應(yīng)”步驟改在“溫度預(yù)處理”之后。

②15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性，是因?yàn)樵诿傅淖钸m溫度前后，可以有不同的溫度條件相同的催化效率。

③15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性，故該酶的最適溫度位于15℃-30℃之間，故在15℃-30℃范圍內(nèi)設(shè)置溫度梯度，可以進(jìn)一步探究酶的最適溫度。

（3）Ⅰ、①該題自變量是不同pH值，因變量為酶活性，所以實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄坎煌琾H對(duì)過(guò)氧化氫酶活性的影響。

②30℃是過(guò)氧化氫酶的適宜溫度，恒溫是排除溫度變化（無(wú)關(guān)變量）對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

Ⅱ、圖中的A曲線和B曲線相比，A曲線在相同時(shí)間情況下，底物剩余量較B多，說(shuō)明酶量更少，是實(shí)驗(yàn)Ⅱ結(jié)果的曲線。